Set de tinción Gram - 1 Set (4 x 100 ml de soluciones reactivas)
Juego de tinción que consta de 4 soluciones listas para usar.
Los microorganismos Gram-positivos aparecen de color violeta, los Gram-negativos de rosa a rojo.
Principio:
La diferente coloración de las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas está estrechamente correlacionada con la diferente estructura de las paredes celulares de los grupos bacterianos mencionados. La tinción con cristal violeta y el posterior mordentado con solución de Lugol crean un complejo de colorante-yodo en la célula que, en las bacterias Gram-positivas, se retiene en la célula bajo la acción del agente decolorante (alcohol, acetona) debido a la permeabilidad reducida de la pared celular. Por lo tanto, los microorganismos Gram-positivos conservan la coloración violeta. En las bacterias Gram-negativas, el complejo de colorante-yodo difunde hacia el exterior a través de la pared celular bajo la acción del agente decolorante. En la posterior contratinción con safranina, los gérmenes Gram-negativos absorben este colorante y ahora aparecen de color rosa a rojo.
Preparación de los frotis: la clave para una tinción exitosa y clara:
-Aplicar una capa delgada de la muestra (concentración ideal de aproximadamente 10^4 - 10^5 células/ml) en un portaobjetos con un asa estéril o un hisopo;
-Después del secado al aire, fijar por calor pasando el portaobjetos varias veces por una llama (advertencia: un calentamiento excesivo del portaobjetos destruye las estructuras de la(s) pared(es) celular(es));
-Las concentraciones celulares demasiado bajas pueden llevar fácilmente a evaluaciones falsamente negativas;
-Una fijación insuficiente (véase más arriba) puede provocar que las células/bacterias sean arrastradas por los propios reactivos de tinción.
También impartimos la técnica de tinción de Gram en nuestros cursos prácticos de AUROSAN: véase www.aurosan.de