Set de tinción Gram - 1 Set (4 x 100 ml de soluciones reactivas)
Kit de tinción compuesto por 4 soluciones listas para usar.
Los microorganismos grampositivos aparecen de color violeta, los gramnegativos de rosa a rojo.
Principio:
La diferente tinción de las bacterias grampositivas y gramnegativas está estrechamente correlacionada con la diferente estructura de las paredes celulares de estos grupos bacterianos. La tinción con cristal violeta y la posterior mordentura con solución de Lugol forman un complejo colorante-yodo dentro de la célula. En las bacterias grampositivas, este complejo se retiene en la célula bajo la acción del decolorante (alcohol, acetona) debido a la permeabilidad reducida de la pared celular. Por lo tanto, los microorganismos grampositivos conservan la coloración violeta. En las bacterias gramnegativas, el complejo colorante-yodo difunde fuera de la pared celular bajo la acción del decolorante. Durante la posterior contratinción con safranina, los gérmenes gramnegativos absorben este colorante y ahora aparecen de rosa a rojo.
Preparación de los frotis: la clave para una tinción exitosa y clara:
-Aplicar una fina capa de la muestra (concentración ideal de aproximadamente 10^4 - 10^5 células/ml) sobre un portaobjetos con un asa estéril o un hisopo;
-Después del secado al aire, fijar por calor pasando el portaobjetos varias veces por una llama (precaución: un calentamiento excesivo del portaobjetos puede destruir las estructuras de la pared celular);
-Las concentraciones celulares demasiado bajas pueden llevar fácilmente a evaluaciones falsamente negativas;
-Una fijación insuficiente (véase más arriba) puede provocar que las células/bacterias sean arrastradas por los propios reactivos de tinción.
También impartimos la técnica de tinción de Gram en nuestros cursos prácticos de AUROSAN: véase www.aurosan.de
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